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JKSPE : Journal of the Korean Society for Precision Engineering

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레�저를 �용해 �착� 세�믹 표면�서� 세균 배양� 대한 �향

Effect on Bacterial Culture on Ceramic Surfaces Deposited Using a Laser

Journal of the Korean Society for Precision Engineering 2023;40(4):269-274.
Published online: April 1, 2023

1 서울과학기술대학� 미래기계기술연구소

2 서울과학기술대학� 기계·��차공학과

1 Future Mechanical Technology Research Center, Seoul National University of Science & Technology ÿØÿàJFIFddÿìDuckydÿáqhttp://ns.adobe.com/xap/1.0/ ÿîAdobedÀÿÛ„ÿÀŠÿÄ     ! 1AQa"q� 2#w8ð‘¡ÁÑB3´µ6v¶7×X±Rr²$˜9áñb’C³Ãt%u&–ÖW·‚s'(xy¢ÂÓ4T”5f‡—ÇH¨¸Ø  !1AQaq"�‘¡2B ±ÁRbr#³´u67ðѲ3sTt5v8áñâSc$4Ä‚’¢C“ÔÔ%UÕÂÒÓ…•FVÅÿÚ ?ßàêÓ_A÷ú‹× ­j- ŠHÌûû>‚>Ì,šm*>½ôßÈÞfzp"áõö—£Téõ‹£—Ær÷Kkr¾ÒÙî��âœ^× »Òr.|_&€ã]¿|*œ™v¿P¶²uܶv”o‡±¿QÇ1Ÿ ¾�ŒŸmÍëw¾VJUöhu-ãIð"=L‹‡n§õ‘iù½AÆ•8Úö�"ûÛ²½þ„� ák�*Ò¿[yùu:ý.Ž‚v«U¤ÒÚQ+•)Ñá%F� D•Hy²V‡è×B훩kš>‘Hêy8øÓj©Ý¹ q~§9Dúñ4íKR‚þm±zõÚíQ„¥ßö)µ^Ê”Ó.J%k_tVi5NTê¥Ójg!'¡k©Çy|5as…¨ðÃOÏÁÈ»)R–¯Û¸ß©FMÔ¿3LÕ4çj¹6dÖùÚœ#êNIwUF©•]J ûq¡BŒô¹/(ËF™aãŠâfJöRzq3à\GÕ›™ ?ö~\£ 6å)6èý•Wµµ4¶m[O›ö^L0ìEË&r¤RMïØ¶*º×ÑC .ÍÂ]Un·l¥Š-1— 1ßr#Rj/¥´ø¯&QɈ׉˩·ás6­Rj=5Tgæ.´êy™.·PÓ¡:ÖJJíS«…÷:îßC8èÝ-Äù„2u]–d�&¢é»Òvøª·Uºz;¾»7p·9‘˜» 5Všã‰nLÖ¢µ£”¢"y)Ц">Ói×™Ñ(ûIDDd|œ¹Ö Yj0·­; L›§ãR¯fÙÞàÝS�˜:k¥ÚÃñtYäK%*ÒN2^ômñ|&dÄŸthó":‡ãÊe§Øy¾)u§P—¶ôQó¡ZöðW)gcC3Pv&“M¾ÇéM¯„ÂWìÏì¬d&¯Å´ãÛ²½�mvŸT¹èRoÞÕªM0Ü3ä*…F3Yº›dûèæãýÃ6¡®èÚ\8õ,¼\h÷Ý» kß”‘õâi¶¡<k× žÞNTõð¦wSëÔªº­Ñmljö•’j[>->±p£tU©Ôâ�%¯'§L‹R>&EÇBïôH$ßÝý�§ÉMQAU¶x[›$Z6’ÒÍv®Ôi&’_“a.K˜IQ{äh©yÆ’½ ’j"JùOCá ê×9òö—ìeäFŒªÒ�´ÞÿfŽjµîí;™ËšÎ©<[3”_m%ÃïÑ÷ ·•l‹¦Q@¥Ö4œ³Ñg²ü�=5$°™(J]YëÁ®c-OMqé<÷ÊÚõÇ�‡“ wSø²�¨¹z’œ«ïÚ—)kš$ÜË7ªV©I¥ïÅPý붾ͯnV+卵*t]i‚ÐŽD¥31ñí~S¨Añí1ûéÃCÐ2u)ÑÂʼnΛãQn-UÅoîi÷3ò´�:®«gß»rI8ý¯ÊØ“Wm*G zà«Ü•)ZÌ×§J}Åê§Yµ Y“lGeJ6ØcB2I ‹NS3×Qµ>kÔõÞ=KT›½ÅBëœâ—ÆÙÎT]ŠŽž‚W鿇¢ÂÞ6œ¬«Ü+ãSÓÛ¦ööï÷Ož—X©QgG©R¦? 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#E-mail: joohankim@seoultech.ac.kr, TEL: +82-2-970-6303
• Received: December 1, 2022   • Revised: January 5, 2023   • Accepted: January 13, 2023

Copyright © The Korean Society for Precision Engineering

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  • The hydrophilicity of the cell culture substrate was controlled by depositing it on the alumina surface through the laser-induced backward transfer (LIBT) method. Alumina particles were sized using laser energy density and deposited on the soda lime glass surface. The particle size and hydrophilicity of the alumina deposition surface were evaluated by measuring the surface roughness, contact angle, and light diffusivity. As the particle size increased, the effect of alumina became stronger, and the deposited surface had relatively higher roughness, stronger hydrophilicity, and higher light diffusivity. The stronger the alumina effect, the lower the growth of Staphylococcus aureus on the deposited surface. In this study, it was confirmed that selective bacterial growth and culture could be controlled by adjusting the strength of the alumina coating using the LIBT process.

E d

Laser Power Density

P eff

Laser Output Power

v s

Pattern Scanning Speed

h

Hatch Distance

d

Total Thickness

θ

Contact Angle

r

Roughness Factor

F

View Factor

A

Surface Area

f

Contact Area Ratio

θ

Normal Angle of Incident Light

Φ

Normal Angle of Reflected Light
세�믹� �용한 배양 배지 재료는 우수한 내 화학성, 다공성, 높� 가공성 � �체 �합성� 가지고 있다. �한, 세�믹 재료� 표면 개질� 세� 배양� 대해 세�� 운�, 접착 � 성장� 제어하는� 중요한 것으로 여겨지고 있다[1-5]. 예를 들어 세�믹 배양지�서 C-ZrO2 복합 기저는 �외선 레�저 조사� �해 탄소 함량� �소시켜 단백질 활성과 접착력� �가시키는 것으로 Roy et al.� �해 연구결과가 보고�었다[4]. 알루미나 복합 기저는 그� 반해 단백질 부착� 방해하여 세� 배양� 막는 경향� 보�다고 Feng et al.� �해 보고�었다[5]. 세�믹 재료는 �반�으로 소결� 통해 만들어지나 세�믹 미세 형� 제조�는 다양한 방법� 존재한다. 레�저는 고품질� 광 �너지를 정밀히 조절할 수 있는 특징� 갖고 있기� 세�믹 형� 제조� �용� 수 있다. 세�믹 표면�서� 세�배양� 경우 표면� 여러 특성� 배양결과� �향� 줄 수 있다. 특히 표면�서� 친/소수성� 배양결과� 중요할 수 있다. 레�저 가공� 통한 다양한 재료� 친/소수성 표면처리법� 대한 다수� 연구가 진행�었다[6-10]. �러한 공정� 대부분 특별한 표면 재료� 한정�어 있으며 레�저� �한 �접 표면 가공공정�다. 재료 표면� 다른 개질� 방법으로는 �착 공정� 고려할 수 있다. 레�저 유� 플�즈마� �한 후방 산란 �착(Laser Induced Backward Transfer, LIBT)� 투명한 모재 뒤 공여체� 레�저 빔� 조사하여 조사 반대 방향으로 물질� 전달하여 모재 뒤편� 타깃물질� �착하는 방법�다. �러한 방법� �용하면 �접 표면 가공� 아닌 마��로/나노 입�� 레�저 �착� 통해 바�오 필름과 같� 세� 배양� 조절� 필요한 3차� 마��로/나노 표면 형�� 국지�으로 형성할 수 있다[11]. 펨토초부터 나노초� �르는 레�저 펄스� �용� 재료 내�서� 비열 특성으로 �해 높� 피� 출력과 비선형 �수 특성� �용하는 것� 가능하다[12,13]. 따�서 �명공학�서 주로 사용하는 세�믹과 같� 단단하고 취성� 높� �체 재료 가공 � �착� 대해 높� 신뢰성과 고품질� 결과물� 기대할 수 있다. �한, 세�배양 바�오 필름� 대한 레�저 패터� �착 처리는 정밀하게 가공� 세� 배양 재료 표면 구조� 형성� 가능하므로 효율�� 세� 배양 컨트롤� 가능하다.
본 연구�서는 모재� 소다 �임 글�스� 알루미나를 공여체로 사용하여 알루미나 입�를 LIBT 방법으로 �착했다. 알루미나는 레�저 패턴� 따� �착 표면과 소결 표면� 형성하였으며 ��� 경우�서 배양배지� 세균 배양 효율� ��� 확�하였다. 실험� 통해 만들어진 표면� �가방법으로 거칠기 측정, 접촉� 측정, 스펙트로미터를 통한 광 확산성 측정� 진행하였다. �러한 결과를 통해 레�저 알루미나 후방 산란 �착� 세균 ��� 미치는 �향� 확�하였다.
LIBT 공정� 개략�가 Fig. 1� 나타나 있다. 조사� 레�저 빔� 알루미나 표면�서 어블레�션 현�� 야기시킨다. � 때 표면�서 발�한 플�즈마� �해 알루미나는 표면�서부터 글�스 표면으로 전달�어 미세입� 형태로 �착 �다. �착� 알루미나 입�는 사용� 레�저 패턴과 ��한 표면패턴� 따른다. 모재� �께는 1 mm�며, 변수로 설정� 레�저� �향� 충분히 무시할 수 있는 �께�다. 실험�서 사용� 레�저 매개변수는 Table 1� 나타나 있다. 사용� 타깃 재료는 알루미나(Al2O3, 97.50%)�다. �착하고� 하는 패턴� 레�저 스�� �� 조절� 통해 시간당 레�저 �너지밀� 변수를 설정하였으며 그 수치는 20-120 mm/s�다. 사용� 스�� 패턴� 10 × 10 mm2� 선형 패턴�며, 패턴 간 오버랩 비율� 0, 50%� 2가지 경우를 사용한다. �층� 사용� 레�저 �너지 밀�는 다�과 같� �� �용�었다[14].
(1)
Ed=Peff vs⋅h⋅d
Fig. 1

Schematic of LIBT process

KSPE_2023_v40n4_269_f001.jpg
Table 1

Laser parameter and material setup

Table 1
Wavelength [nm] 1,064
Energy density [J/mm3] 16.7-100
Pulse duration [ns] 4
Beam spot size [μm] 50
Substrate Soda lime glass
Target Alumina (Al2O3)
여기서, Ed는 3차� 레�저 �너지밀�, Peff는 출력, vs는 스����, h는 해치거리, d는 층 �께�다. � �� �용하여 실험�서 사용� 단위공간 �역�서 레�저 �너지밀�를 환산하면 16.7-100 J/mm3�다.
실험결과는 광학현미경(BX51M, Olympus/Japan)� 통해 표면 형�� 확�하였고, 공초� 현미경(LSM 800 BIO, Carl Zeiss/Germany)� 표면 형� 측정과 접촉� 측정(CAM-200, KSV/Finland)� 결과를 통해 표면 거칠기 등� 미세 형�� 확�하였다. 미세 �층 � 표면 위� 황색���구균� 배양한 후 셀 카운트 결과를 통해 표면성질� 세균 ��� 미치는 �향� 확�하였다.
3.1 미세 표면 형� 분�
Fig. 2는 LIBT로 �착� 알루미나 패턴� �착 형��다. 16.7 J/μm3 �너지 밀�로 �착한 시편�서 알루미나 입�� �기는 �균 �경� 약 500 nm, 100 J/mm3� 조건�서는 �균 약 10 μm� �경� 갖는 것으로 측정�었다.
Fig. 2

OM image of Al2O3 particle deposition using LIBT

KSPE_2023_v40n4_269_f002.jpg
Fig. 3는 시편�서 표면들� 대한 공초� 현미경 측정 결과�다. � 시편� 알루미나 패턴 표면 형�� 대한 3차� �미지가 ���었다. � ��터를 기반으로 � 패턴 경우� 표면 거칠기를 Ra 값� 통해 계산� 가능하였다. 레�저 �너지 밀�� 대한 알루미나 패턴� 표면 거칠기� 대한 그래프 결과가 Fig. 4와 같� 얻어졌다. 표면 거칠기 Ra 값� 16.7 J/mm3� �너지밀��서 0.57 μm, 20 J/mm3�서 0.96 μm, 33.33 J/mm3�서 1.77 μm, 35 J/mm3�서 1.21 μm, 50 J/mm3�서 1.29 μm, 100 J/mm3�서 1.65 μm� 표면 거칠기로 측정�었다. �는 �너지 밀�가 높�수� �대�으로 � 입�가 만들어져 거친 표면� �고, �역� 가해지는 레�저 빔� �너지 밀�가 낮�수� �성�는 입�� �기가 작아져 �대�으로 매�한 표면� 형성하는 것으로 볼 수 있다.
Fig. 3

(a) Soda lime glass surface. Alumina deposited surface using laser influence of (b) 16.7, (c) 20, (d) 33.3, (e) 35, (f) 50, (g) 100 J/mm3

KSPE_2023_v40n4_269_f003.jpg
Fig. 4

Ra number of alumina surface samples

KSPE_2023_v40n4_269_f004.jpg
3.2 표면 접촉� 분�
표면 성질� 친/소수성� 구분하는 방법으로 액체� 접촉� �론� �용하였다. 접촉� �론� �게 표면� 완전히 �시는 경우� Wenzel Model과 완전히 �시지 못하는 경우 접촉하는 면�� 비율� 설명하는 Cassie-Baxter Model� 있다[15,16]. ��� �론�서 설명하는 접촉�� �(2)와 �(3)� 통해 나타낼 수 있다.
(2)
cos�θw=rcos�θs
(3)
cos�θCB=fcos�θs+1-fcos�θair 
�(2)는 Wenzel� Model, �(3)� Cassie-Baxter Model� �용�는 관계를 나타낸다. �(2)�서 r� 거칠기 계수�며 고체와 액체간 접촉면�� 투�면�으로 나눈 값�다. θs는 매�러운 고체표면�서� 접촉��다. θw는 액체� 접촉�� 나타낸다. θs 값� 90o �하� 경우 친수성 표면� 나타내며 r� �가할 때 θw가 �소한다. θs가 90o ��� 경우 소수성 표면�며 r� �가할 때 θw가 �가한다. �(3)�서 f는 접촉면�� 전체면�으로 나눈 값�다. 접촉면�비가 f� 표면�서 공기� 접촉면�비는 (1-f)로 정�한다. θair는 공기 접촉��며, �것� 180o�다.
Fig. 5는 레�저 �너지밀� 16.7-100.0 J/mm3�서 ��� 경우� 대한 접촉� 측정 결과�다. 코팅� 한 기저� 알루미나 입�가 �착�었다. 기준� �는 유리 기저 표면� 접촉�� 101.4o�다. �너지밀� 100 J/mm3로 �착� 알루미나 표면� 접촉�� 45.7o�며 �는 친수성 표면으로 �별�었다. 50 J/mm3� 경우 접촉�� 73.2o�므로 역시 친수성 표면으로 확��었다. �너지밀�가 35 J/mm3 �하� 경우�는 알루미나 계면� 기저� 표면특성� �향� �치지 못하는 것으로 나타났다. �를 종합해 볼 때, 낮� 스�� ���서 레�저 �너지밀�가 50-100 J/mm3으로 충분한 경우 표면 특성� 알루미나� �해 접촉�� 73o �하가 �어 친수성 표면� �는 것� 확�하였다.
Fig. 5

(a) Hydrophobic coated soda lime surface. Alumina deposited surface using laser power (b) 16.7, (c) 20, (d) 33.3, (e) 35, (f) 50, (g) 100 J/mm3

KSPE_2023_v40n4_269_f005.jpg
3.3 광 확산성 분�
표면 분�� 있어서 광 확산성 측정법� 표면� 난반사광 휘�를 측정하여 표면� 미세 형�� 균��를 확�하는 방법�다. 사용� 스펙트로미터 장비(HR4000, Ocean Insight/USA)� 측정방법� 대한 개략�가 Fig. 6� 있으며 �반�� 스펙트로 미터 측정방법�서 기준광� 반사�를 확산면� 기준으로 사용한다. � 물체 사�� 형�계수(View Factor)를 F12� 정�하며 다�과 같� �(4)로 나타낼 수 있다[17].
(4)
F12=1A1∫A1 ∫A2 cos�θcos�∅πr2dA1dA2
Fig. 6

Schematic of view factor theory

KSPE_2023_v40n4_269_f006.jpg
A1�서 A2로� 입사광� 시편표면�서 난반사� �해 확산�어 �부만 스펙트로미터로 ��아온다. � 때 ��아온 광� 세기를 기준광과 비�하여 정반사율� 낮�수� 확산성� 높고, 정반사율� 높�수� 확산성� 낮다고 할 수 있다. Figs. 6과 7� 알루미나 표면� 광 반사율� 통해 간접�으로 광 확산성� 측정한 결과 그래프�다. 16.7 J/mm3� 낮� �너지밀�로 알루미나를 �착한 표면� 경우 �대�으로 높� 광 반사율� 보�므로 보다 매�하고 작� 입�로 �루어져 있으며 기저표면� �향� 받는 특성� 보�다고 할 수 있다. 반면 100 J/mm3� 높� 레�저 �너지밀�� 경우�는 �대�으로 � 알루미나 입�� �한 난반사로 �해 높� 광 확산성� 갖는 표면��고 볼 수 있다. �러한 표면 성질� 세� 배양� 있어 세� 성장� 컨트롤할 수 있는 요소로 확�하였다. �러한 �리를 �용하면 레�저 �너지 밀�� 따른 세�믹 �층� 조건� 따� 세� 배양� 효과를 조절할 수 있� 것으로 �단할 수 있다.
Fig. 7

Spectrometer intensity of alumina surface about laser influence

KSPE_2023_v40n4_269_f007.jpg
Fig. 8

Reflectance of alumina surface vs. reference of diffuse surface

KSPE_2023_v40n4_269_f008.jpg
Fig. 9

Cell counts graph of each samples 16.67-100 J/mm3

KSPE_2023_v40n4_269_f009.jpg
3.4 황색���구균 배양 분�
Figs. 10(a)는 글�스� �착 � 알루미나� 표면�며, 10(b)부터 10(g)는 알루미나가 �착� 표면�서 배양� 황색���구균� 샘플 사진�다. 높� �너지밀�로 �착� 알루미나 표면�서는 세균� 잘 ��지 못하게 �는 결과를 얻었다. 앞� 실험�서 �대�으로 � 입�로 �루어진 알루미나 표면� � 친수성� 갖게 �며, �대�으로 작� 입�로 구성� 알루미나 표면� 보다 작� 친수성� �는 것과 관계가 있다고 �단�다. 기저 표면� 표면�너지가 높�수� �는 친수성 표면�서 세균�나 세�� 부착� 잘 �어난다는 연구결과들� 있다[7-10,18]. 따�서 �반�� 친수성 기저�서� 세균/세� ��� 소수성 기저�서 보다 � 잘 �어나는 것� 예측할 수 있다. 하지만 알루미나 코팅면�서는 �러한 경향� 반대로 나타난다[1,5] 선행 연구� 따르면 알루미나 코팅� 친수성 형태를 가지지만 분�구조가 단백질과� 결합� 방해하기 때문� 높� 표면�너지�� 불구하고 세�� 분열과 성장� 억제한다고 보고하고 있다[5].
Fig. 10

Bacterial culture results of (a) soda lime surface, (b) 16.7, (c) 20 (d) 33.3 (e) 35 (f) 50 (g) 100 J/mm3 alumina surface

KSPE_2023_v40n4_269_f010.jpg
Fig. 10� 레�저 �너지 밀�� 따른 세균 배양 결과�다. 낮� 레�저 �너지 밀�로 �층 � 경우�는 작� 입�� 구조� 특성과 입�로 코팅� �지 않는 간��� 유리기저� �향으로 세균� ��� 많� �어난 것으로 보�다. 반면� 알루미나 입�� �향� �너지밀� 30 J/mm3 ��� 때 �균 약 5 μm �기� 입��서 나타나기 시작해서 100 J/mm3� 약 15 μm �기� 입�환경�서는 균� 성장� 억제�고 있는 것� 확�할 수 있었다. �는 LIBT를 통해 �착� 알루미나 표면�서 그 입�� �기� 따� 세균� ��� 조절 할 수 있는 방법� 갖는다고 볼 수 있다.
LIBT 공정� 통해 알루미나 입� 물질전달 방�� 표면처리를 통해 배양기저� 표면�너지를 변화시키는 실험� 수행�었다. 알루미나 �착 표면� 특성� 표면 거칠기, 접촉�, 광확산성 측정� 통해 �가�었다. LIBT� �용�는 시간당 레�저 �너지밀�가 높아질수� � �경� 알루미나 입�가 산란 �착 �었다. 입��기가 커질수� �대� 거칠기는 커지고 접촉�� �소하였으며, 광확산성� �가하였다. �착 입�� �기가 �수� 모재 표면� �향� 줄고 알루미나 �착 표면� �향� 강해졌다. � 알루미나 표면� 황색���구균� 배양하였� 때 알루미나� �향� 강해질수� 균� ��� 억제하게 �었다. 따�서 �대�으로 레�저 �층 공정� 통해 알루미나� 코팅� 강�를 조절할 수 있� 것으로 �단�며 �를 통해 선�� 세균 배양 �는 ��� 조절할 수 있다. �러한 �리는 세균 배양� 있어 그 목�� 따� 다양한 형태로 �용� 수 있� 것으로 �단한다.
� 연구는 정부(과학기술정보통신부)� 재�으로 한국연구재단� 지�� 받아 수행� 연구임(No. NRF-2021R1F1A1045844).
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Sangwoo Yoon
KSPE_2023_v40n4_269_bf001.jpg
Ph.D. in the Future Mechanical Technology Research Center, Seoul National University of Science & Technology. His research interest is laser processing and analysis.
Joohan Kim
KSPE_2023_v40n4_269_bf002.jpg
Professor in the Department of Mechanical Engineering, Seoul National University of Science & Technology. His research interest is laser processing.

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Effect on Bacterial Culture on Ceramic Surfaces Deposited Using a Laser
J. Korean Soc. Precis. Eng.. 2023;40(4):269-274.   Published online April 1, 2023
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Effect on Bacterial Culture on Ceramic Surfaces Deposited Using a Laser
Image Image Image Image Image Image Image Image Image Image
Fig. 1 Schematic of LIBT process
Fig. 2 OM image of Al2O3 particle deposition using LIBT
Fig. 3 (a) Soda lime glass surface. Alumina deposited surface using laser influence of (b) 16.7, (c) 20, (d) 33.3, (e) 35, (f) 50, (g) 100 J/mm3
Fig. 4 Ra number of alumina surface samples
Fig. 5 (a) Hydrophobic coated soda lime surface. Alumina deposited surface using laser power (b) 16.7, (c) 20, (d) 33.3, (e) 35, (f) 50, (g) 100 J/mm3
Fig. 6 Schematic of view factor theory
Fig. 7 Spectrometer intensity of alumina surface about laser influence
Fig. 8 Reflectance of alumina surface vs. reference of diffuse surface
Fig. 9 Cell counts graph of each samples 16.67-100 J/mm3
Fig. 10 Bacterial culture results of (a) soda lime surface, (b) 16.7, (c) 20 (d) 33.3 (e) 35 (f) 50 (g) 100 J/mm3 alumina surface
Effect on Bacterial Culture on Ceramic Surfaces Deposited Using a Laser
Wavelength [nm] 1,064
Energy density [J/mm3] 16.7-100
Pulse duration [ns] 4
Beam spot size [μm] 50
Substrate Soda lime glass
Target Alumina (Al2O3)
Table 1 Laser parameter and material setup